2.2.抗HBs(HBsAg)
急性乙型肝炎病人处于恢复期后,随着HBsAg的逐步消失,血清中出现抗HBs,抗HBs是一种中和抗体,其能在体内存在相当长的时间,以HBsAg作为疫苗免疫机体产生的抗HBs,对HBV的感染具有保护性免疫作用。lOmlu/ml抗HBs为表明对HBV具有免疫力的临界水平.低于此值,说明免疫失败。接受乙肝疫苗接种者,体内血循环中除了抗HBs外,不应出现其它乙肝病毒感染血清免疫学标志物,如抗HBe、抗HBc等,一旦出现除抗HBs以外的标志物,则应视为既往HBV感染。
一般情况下,血清中抗HBs和HBsAg不同时存在,若同时检出,可能为抗HBs产生的早期,或属于不同亚型的HBV感染,或由HBv的S基因变异所致。
2.3.HBeAg
HBeAg为HBcAg的可溶性成份,两者约有75%共同的氨基酸序列,但二级结构不同,各有特异的抗原决定簇,因而在细胞水平其体液免疫应答是不同的。其在血清中的出现时间稍后于HBsAg,一般血清HBeAg阳性者,HBsAg亦为阳性。有研究表明,当乙肝病毒的前核心区发生点突变时,可使得HBeAg无法表达,表现为血清HBeAg或抗ffBe测定持续为阴性,但血清HBsAg或HBV DNA可表现为阳性。
HBeAg与病毒Dane颗粒、HBV DNA具有伴随关系,是HBV复制活跃的血清学指标,血清HBeAg阳性说明传染性强,急性乙肝病人血清HBeAg持续阳性3个月以上,则有疾病慢性化倾向。
2.4.抗Hbe
当血清HBeAg转阴后,可出现抗HBe.两者同时阳性较少见。抗HBe阳性说明病毒复制减少,传染性弱,但并非没有传染性。
抗HBe不是保护性抗体,这一点与抗HBs不同。
2.5.总抗fBc和抗HBc IgM
从机体对HBV抗原的免疫应答来看,最早出现的是对HBcAg的细胞免疫应答(HBcAg的免疫原性最强),随后才发生对HBcAg的体液免疫应答产生抗HBc,总抗HBc包括抗HBc IgM、IgA、IgG和IgE等。抗mc IgM可以说是机体感染HBV后在血液中最早出现的特异抗体,在肝炎的急性期呈高滴度,是判断急性乙型肝炎的重要指标,随着急性乙肝的恢复,抗HBc IgM滴度(以及抗HBc IgA)降低乃至消失,如持续高滴度,则常表明病人乙肝有慢性化倾向。研究表明在慢性活动性乙型肝炎患者血循环中,抗HBc IgM检出率及滴度亦较高,说明HBV在体内复制活跃,是传染性强的指标之一。抗HBc不是保护性抗体。抗HBc在血中呈低滴度且与抗HBs同时存在,是既往感染的标志。
2.6.HBV DNA
血中HBV DNA的存在是HBV感染最为直接,最为灵敏和最为特异的指标。HBV DNA检测方法目前在国内使用最广的是聚合酶链反应(PCR)。使用PCR检测血中HBV DNA,其临床治疗价值主要有:
(1)急性HBV感染的诊断。当机体感染HBV时,在外周血中HBV DNA的出现要早于其它血清学抗原抗体指标,并且只有HBV DNA存在才会引起感染,因此使用极为灵敏特异的PCR方法检测HBV DNA可为急性HBV感染提供直接证据。
(2)可用于筛选献血员,监测血制品的传染性、血源性乙肝疫苗的安全性以及乙肝治疗药物抑制病毒复制的效果。
(3)HBV DNA PCR检测结果与血清免疫学检测结果的综合评价:乙肝"两对半"或乙肝"六项"("两对半"加上抗HBc-IgM)的ELISA检测,是临床实验最常用来检测乙肝的方法,如何看待其检测结果与HBVDNA检测结果之间的关系,是临床医生以及患者最为关心的问题,关系到临床治疗方案的确定。
①与HBsAg检测结果的关系。在实践中,常遇到的问题是HBsAg ELISA测定结果与HBV DNA检测结果之间的不一致,有两种情况:一是HBsAg阴性而HBV DNA PCR测定阳性,二是HBsAg阳性但HBv DNA阴性。前者可能是因为HBsAg ELISA测定敏感性低,对极低浓度的HBsAg测不出,而PCR具有极高的灵敏度,HBV DNA含量即使很低(甚至低至数个分子),亦可检测出来:或HBsAg确己消失,但HBV DNA仍持续存在,病毒仍处于低水平复制状态:此外,在HBv初期感染时,也可能是有HBv DNA而无HBsAg。HBV DNA阴性才是HBV消除的明确指标。HBsAg阳性而HBV DNA阴性其原因一为血中HBv DNA虽然存在,但是在特定的PCR检测方法的下限以下,如有的PCR试剂灵敏度差,检测HBV DNA的下限仅至1000或100个拷贝。第二种可能为血中存在的HBsAg是由HBV DNA整合到人染色体与宿主基因共同表达所致,所以测不到血清中病毒DNL通常,HBSAg阳性血清,PCR检测HBV DNA的阳性率约为96%。肝组织活检样本mv DNA PCR检测阳性率为100%。
②与抗HBs的关系。HBV感染后至恢复期抗HBs阳性,血清HBV DNA PCR检测-般为阴性,少部分亦可机但肝组织HBv DNA PCR阳性率仍可高达77.3%说明HBV存在于肝脏中。
③与HBeAg、抗HBe和抗HBc的关系。HBeAg阳性血清,HBV DNA PCR检测几乎全为阳性:HBeAg阴性而抗HBe和抗HBC阳性者,血清HBV DNA PCR的阳性率采用电泳法检测产物仅市为30%,但使用核酸探针杂交方法检测产物,阳性率可高至80%.慢性乙肝患者外周单个核细胞甲HBV DNA PCR检测阳性率较高,是乙肝复发的一个主要原因。血清抗HBe阳性,说明病毒复制减弱,血中HBv DNA减少,但并未完全消失,因此PCR检测是评价传染性的最可靠的方法。
④ 疗效果和抗病毒药物的疗效评价。使用定量PCR测定血中HBV DNA的量在患者治疗中的变化,可以判断相应药物的疗效,从而有利于采取有效的治疗方案。
总而言之,HBV DNA的PCR检测是判断HBV感染的最为可靠的方法,不但可用于乙型肝炎病毒感染的早早诊断、以及诊断的明确和治疗效果的评价、预后等,而且是判断患者有无传染性的最直接指标。