HBV-DNA的检测方法
目前检验病毒的方法,除去血清培养基方法(HIV, CMV, HBV等病毒很难在培养基中分离检验),大致有三种::
PCR (polymerase chain reaction 或RT-PCR等),最常用的方法,很敏感,但误差大,价钱比较贵,通常单位用 copies/ml of plasma;
bDNA (branched chain DNA assay), 也是目前常用的方法,敏感,常规化,结果比较稳定,价钱比较便宜,通常单位用 units/ml of plasma (pg/ml, fg/ml);
NASBA (nucleic acid sequence-based amplification),不常用,很敏感,误差大,工时长,价钱最贵,通常单位用 units/ml of plasma (pg/ml, fg/ml);
就HBV-DNA而论,目前测验HBV-DNA时通常要达到两个目的。一个是定性(qualitative),另外一个是定量(quantitative) 。
HBV-DNA定性的测验注重于HBV-DNA的存在,它通常可以测到低于100copies/ml的病毒存在。当然还有更精确的方法,通常用于科研实验室中,可以测到更低的含量。 一般临床用的都可以测到1000-2000 copies/ml以上的精度。定性通常只给阴性、阳性的结果。
另外一方面,定量的测定着重于HBV-DNA量存在的多少。通常用于定量的极限在0.1-5 pg/ml (1 pg/ml = 283,000 copies/ml)之间。同样,更精确的仪器可以测到0.001-0.005 pg/ml的精度。国外常用 fg/ml 为单位。copies/ml 比 fg/ml, pg/ml 单位更小。fg/ml, pg/ml 显示定量比 (?) X 10?易懂不容易错。
关于 copies/ml, pg/ml, fg/ml的换算大致如下:
Picogram: 1 pg = 10-12 g= 10-9 mg= 10-6 mg= 10-3 ng= 103 fg
Femtogram: 1 fg= 10-15 g= 10-12 mg= 10-9 mg= 10-6 ng= 10-3 pg
1 pg/ml = 283,000 copies/ml